液相色谱分析柱的使用误区讲解

 　　液相色谱分析柱使用过程中，一些客户是会存在一些错误的做法的，那么都有哪些使用误区呢?为了给其他客户一些借鉴，小编整理几点如下：

　　一、不去看说明书，直接就上机使用

　　色谱柱内部保存着什么溶剂一定要看清楚，因此液相色谱分析柱的说明书一定要看清楚，当然也包括说明书上建议的维护保养规定，对我们都非常的有用。对于反相柱来说，溶剂基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了，因为正相柱除了可以适用正相系统，也可以适用反相系统，因此一定要看清楚，对于你的方法来说是否需要置换色谱柱内部保存溶剂。

　　二、液相色谱分析柱的流向不能改变

　　在我们常规思维中，液相色谱分析柱上标示的流向是不可改变的，每次使用都要遵循。可是，大家有没有想过这个方向的作用是什么呢?为什么要标示一个使用方向呢?其实色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那么这个流入段就是zui先污染端。这样就为我们日后维护或再生色谱柱做了准备，而我们需要遵循这个规定应该在色谱柱开始做样后。

　　我曾将已经污染过的色谱柱反方向来使用，如果保留时间不是很长，而色谱柱足够长，还是能使用一段时间的。

　　三、用纯水冲洗色谱柱才能把缓冲液冲洗干净

　　使用强溶剂冲洗色谱柱对内部填料的损伤是zui大的，尤其是纯水，除非你的色谱柱是耐水的。冲洗液相色谱分析柱的方法是用流动相比例的水系和有机系来冲洗。如果你认为流动相比例无法把色谱柱冲洗干净或者此比例中有机系占有比例过大，你可以使用内含10%左右的纯水来冲洗。

　　四、保存在乙腈或甲醇中的新色谱柱可以直接使用

　　理论上液相色谱柱不同于气相色谱柱需要活化，但是由于液相色谱柱内部保存的有机系具有挥发性，因此在使用前还是应该用小流速的和色谱柱内部相同的溶剂冲洗一定的时间。可以是0.5ml/min，120min，但咨询厂家，根据色谱柱参数设定。

　　五、液相色谱分析柱污染后把筛板卸下来超声清洗

　　对于色谱柱的污染，*的就是筛板，因此我们zui常用的做法就是把柱头卸下来，把筛板拿去超声清洗。但是我们在拆卸过程中对色谱柱前端填料的损害远远大于污染照成的伤害，因为我们不是专业的。因此建议这一步能不做就不做。

　　六、自己填装液相色谱分析柱

　　自己填装液相色谱分析柱，这一步做法几乎可以把此色谱柱判死刑了，我们的填装工具有什么呢?就是手工的，其填装压力远远小于工厂内原始的填装压力。那么我们填装的结果会是个什么样也就很明显了。

　　在我看来，自己填装也就是练练手，熟悉一下这个过程，要把液相色谱分析柱维修好的可能性几乎为零。

　　介绍了液相色谱分析柱的六个使用误区后，再给大家讲讲液相色谱分析柱正确的安装、保存及平衡。

　　1、液相色谱分析柱的安装

　　色谱柱在使用过程中避免强烈的碰撞和震动。各个厂家生产的色谱柱在接口尺寸上有差异，如果柱头类型和不锈钢毛细管接头两者类型不匹配，将会产生漏液或者死体积过大的现象。接头比柱头深度长，不易拧紧而漏液;接头比柱头深度短，柱头内留有空隙而产生死体积，使谱带展宽和峰拖尾。

　　2、液相色谱分析柱的保存

　　遵守色谱柱说明书中的保持方式。在实际应用中为了方便也可以如下使用：短期保持用所用的流动相保存为佳，这样做可以减少下次使用的平衡时间。一般情况下，建议长期用80%甲醇或乙腈来保存反相柱。纯有机相保持有zui大限度减少键合相水解的作用，但纯甲醇(乙腈)又会将已水解而暂时吸附在柱内的键合相洗脱出去，使固定相流失进程加快，缩短寿命;另外，纯有机相保存时，溶剂易挥发，导致柱床变干，也会容易损坏色谱柱。正相柱一般应保持在所用流动相中。

　　3、液相色谱分析柱的平衡

　　色谱柱平衡指的是用完整的分析程序，运行几遍测试，等观察到峰形、保留时间和峰面积稳定为止，平衡即完成。另外，在使用缓冲盐时，应该先使用水过渡后，再将缓冲盐引入色谱柱，以防止盐析发生，从而损坏液相色谱分析柱。