C18色谱柱因键合方式的不同、粒径的不同、长度的不同，内径的差异等多方面因素，呈现出不同选择性。这样，在市场上就出现了数百种具有不同分离选择特性的C18色谱柱。
对于传统的C18色谱柱，pH值使用范围通常为2～7，因为pH值高于8时C18固定相会受到限制。由于残余硅羟基的存在，易对碱性化合物造成不可逆吸附，造成峰拖尾，影响分离与分析。pH值太低则会使键合的烷基脱落，而且对成分的分离达不到要求。
1、酸性条件下C18的选择
为了改善C18色谱柱在低pH值时的稳定性，有人提出了空间位阻方法。
空间位阻作用是指连接较大基团，立体阻碍溶质基团进攻硅醇基，使硅氧烷能够再生，提高了化学键合固定相抗水解的能力。
还有人制备了侧链中含有异丙基或异丁基的C18化学键合固定相。该固定相由于引入了较大的侧链基团，立体阻碍了残留硅醇基与溶质之间的相互作用，在低pH值条件下能够保持稳定，这种化学键合固定相更适合酸性物质的分离。
Zorbax Stable Bond C18色谱柱就使用了空间位阻技术，其使用单官能团硅烷，具有较大的二异丁基(SB-C18)侧链基团，空间位阻关键的硅氧烷键合到硅胶表面，以避免在低pH值条件下水解破坏，在酸性流动相条件下提供良好的稳定性和重现性。因此，Stable Bond色谱柱成为低pH值方法开发的很好的选择。在方法开发初期，若选定流动相为酸性，可将此类色谱柱作为很好的选择。
2、碱性条件下C18的选择
制造快速分离碱性化合物的化学键合相一直是研究热点。
双齿键合固定相的每个硅烷化分子中含有两个硅原子，两个硅原子之间以-O-或-CH2-CH2等基团连接，每个硅原子含有1个C18官能团。它的环状结构无论在低pH值条件下，还是高pH值条件下均显示了较高的稳定性和满意的柱效。
与传统的单齿化学键合相相比，这种化学键合固定相突出的优点是在低、中、高pH值时都有很好的稳定性。使用C18双齿化学键合固定相的商品柱有Zorbax Extend-C18色谱柱，其耐受pH值达11.5，特别适合在高pH值的流动相条件下对强碱性化合物进行有效的色谱分离。
